Luminex常见问题及解答

LUMINEX应用于哪些领域?

生物医学研究，生物标记物开发，临床检测等领域。Luminex技术主要用于蛋白和核酸检测分析。

LUMINEX敏感性如何？

灵敏度取决于开头的质量。对于同样的抗体对，Luminex检测的灵敏度高于ELISA技术。一般检测灵敏度在pg级。

对不同类型的样品制备和样品量的要求是怎样的？

血清、血浆是常用的样本，通常每次检测需要25ul， 每次可以检测多个蛋白。

从各种细胞或组织中提取的蛋白也可以用Luminex技术检测，制备方法与ELISA、Western Blot相似。

一般可以检测到多少基因或蛋白的表达信息？

检测蛋白和基因的数目主要取决于试剂盒。 蛋白质检测目前最高可以达到50个左右，基因检测最高达500个。

如何保证检测结果的特异性？

检测的特异性取决于抗体高特异性。 试剂几乎全部来源于美国大公司，产品经过了严格的质量控制。同时，我们检测公司也有近15年的经验、严格的操作程序和质量控制体系。

客户自己提供抗体，是否可以进行LUMINEX检测？

Luminex和ELISA检测试剂都需要两个配套的特异性抗体。我们公司具有开发Luminex试剂盒的经验。但是，需要一系列的开发工作才能保证结果的特异性、重复性和可靠性。

除了蛋白，LUMINEX技术是否还可以用于其它指标的检测？

可以用于基因表达，基因多态性和HLA配型分析。

检测周期多久？

视待测蛋白的种类、数量和标本数量定。一般来说，检测一组蛋白（1-50个，视蛋白种类定）和一组标本（多达360个标）需要3-4小时的操作时间及基本数据分析。但是，检测周期也取决于公司当时的工作量。一般来说，从标本收到起，检测应在1-2周完成；但是部分蛋白试剂盒需要收到订单后从美国进口，检测周期可能会延长到4-5周。

如何判定 LUMINEX数据表达水平差异有无意义？

表达差异主要取决于标本的性质和数量，我们公司为客户提供专业的数据统计服务。

LUMINEX实验和流式细胞仪的优劣比较?

Luminex技术是流式细胞仪和微球相结合的蛋白、核酸检测技术， 检测对象是蛋白质、DNA等大分子。普通流式细胞仪主要用于检测整体细胞表面或细胞内的蛋白表达情况。Luminex检测蛋白和标本数目大，是一种高通量检测技术。普通流式细胞仪每次只能检测几种蛋白分子，而且检测速度较慢，不适合高通量分析。 由此可见，两种方法应用方向有很大差别。

报告的格式如何？

报告以xcel和PDF两种格式形式，包括每种蛋白在每个标本中的表达量。公司也可以为客户提供数理统计分析结果。

完成一个LUMINEX的实验,需要的细胞的量是多少?

至少25ul的血清、血浆，蛋白提取物， 或50-100万细胞。

如何控制LUMINEX检测的质量？

我们对每一次检测都设定标准曲线，并设定内参进行校正。我们会定期做仪器校正，检测精密度和重复性实验以确保检测结果的可靠性。

实验失败有几种原因?

从实验室角度看，成败原因包括试剂盒的质量，待测样品稀释倍数；待测蛋白质低于仪器检测底限，实验操作程序。

从客户角度看，成败取决于样品制备，保存和运输是否恰当。我们公司可以提供规范操作程序，供客户参考。

得到实验的结果后, 可以进行那些研究的工作?

可进行多方面的研究，例如：观察不同实验条件对待测蛋白含量的影响，可进行药物作用靶点研究，不同人群血样生物标记物的研究，健康评估，疾病诊断，指导治疗等。

经过分析后，若得到几百个感兴趣的基因或蛋白，如何对这些基因做功能分类或者Pathway相关分析呢？

分析方法与其它技术平台一样，我们公司可以提供全套有偿服务。

如何考虑LUMINEX重复实验的问题？

我们每次都会对使用的标准品和内参做重复性测定，同时也建议对每份样本进行重复2次测定。

在进行LUMINEX实验时，由于经费的限制，是否可以把多个样品进行混合以消除样品的个体差异后再上LUMINEX检测？

不建议这么做。多个样品做检测，计算平均值和误差才有统计学意义。如果多个样品混合后测定只能算1份样品。

客户是组织的样品，准备自己提取样品，请问样品提取方面有没什么技术要求？

需要采用对抗原抗体反应，或者蛋白质抗原性没有抑制作用的提取液进行提取，避免采用会造成蛋白质变性的试剂，如高浓度的尿素或者盐酸胍等。

需要能完全提取待测蛋白质，否则对结果会造成误判。

提取以后需要怎么保存，怎么运输？

建议保存于-80度。避免反复冻融。可用干冰运输。

LUMINEX的假阳性率是多少?

技术性的假阳性率非常低，小于1%。生物假阳性率取决于每个蛋白的生物学特征。

可开展此项目的临床科室有哪些？

目前我公司拥有的世界最先进的高通量液相芯片检测技术，在国内仅有3台。

是否可以将同一症状的病例混合后抽提,看共性表达?

可以。混合后的样品将被视作单一样品进行检测。

服务流程如何？

帮助客户制定检测方案→样品检测→结果分析→报告出具→可为客户提供更深层次的服务（实验设计、数据分析、论文撰写与发表）

如何订购您们的服务？

通过咨询，协商检测方案，然后付费或签订合同。

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